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热点产品 | 发色底物S-2222:多盐型FXa特异性底物,选型指南与检测应用全解析
2026/7/31 16:15:06 浏览量(33)S-2222
发色底物S-2222是一种化学合成的Factor Xa(活化X因子,FXa)特异性底物,属于对硝基苯胺(pNA)类显色肽底物。该底物通过模拟凝血酶原中天然FXa酶切位点的四肽序列(Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA),实现对FXa活性的高特异性识别与定量检测。
在凝血机制研究、抗凝药物(如肝素)活性测定及诊断试剂开发中,FXa的活性检测是关键一环。然而许多研发人员在采购发色底物S-2222时常常面临困惑:市场上不同形态(如Free Base、HCl盐、醋酸盐等)的S-2222究竟有何异同?如何根据自己的体系选择最适合的规格?
今天就以金赛途的发色底物S-2222为例,将发色底物S-2222选型说清楚。
一、先认识这个“S-2222”
中文名:发色底物S-2222
英文名:Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA
简 称:S-2222 (Free Base)
CAS号:59068-47-2
分子式:C32H43N9O9
分子量:697.75
规 格:100 mg / 500 mg / 1 g(支持定制包装)
形 态:类白色结晶粉末
货 号:G04040007
库 存:现货
信 号:黄色(pNA)
S-2222并不是单一规格,而是一个包含多种盐型的产品系列,核心结构均为Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA骨架,区别在于成盐形式:
1. CAS: 59068-47-2, Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA
2. CAS: 1325307-57-0, Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA ∙ Acetate
3. CAS: 60457-00-3, Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA ∙ HCl
4. CAS: 102601-24-1, Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA ∙ HBr
5. CAS: 130928-07-3, Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA / Bz-Ile-Glu(Me)-Gly-Arg-pNA = 1 / 1
表1 金赛途S-2222系列
二、工作原理
发色底物S-2222的检测原理基于酶促显色反应。S-2222可被FXa特异性识别并催化水解,其酰胺键(Arg-pNA)断裂后释放出发色基团——对硝基苯胺(pNA)。本品提供盐酸盐、醋酸盐等多种盐型,不同盐型的显色反应原理一致,检测结果不受盐型影响,您可根据实验体系灵活选择。
• 显色机理:当FXa催化水解S-2222时,会特异性切割肽链,释放出发色基团对硝基苯胺(pNA)。
• 信号读取:释放出的pNA在 405 nm 波长处具有显著光吸收,吸光度与酶活性成正比,可实现极高灵敏度的定量检测。
三、应用场景
1. 凝血因子检测
• 测定血液中的X因子(FX)活性
• 测定血液中的Xa因子(FXa)活性
2. 抗凝治疗监测
• 检测血液中的Xa因子抑制剂
• 测定血液中的肝素钠浓度(基于抗Xa活性)
3. 凝血级联相关检测
• 测定血液中的VIII因子活性
4. 特殊领域应用
• 测定鲎血液中的凝固酶
• 测定十二指肠液中的胰蛋白酶活性
四、核心优势
✅ 特异性明确,靶向清晰
• 酶选择性:S-2222对FXa具有高度选择性,对凝血酶不敏感,确保在复杂凝血体系中检测的是目标酶活性而非干扰信号。
• 交叉反应谱:同时对胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、顶体蛋白酶及XIIa因子具有响应,可拓展至多种酶活性检测场景。
✅ 灵敏度高,低浓度可测
• 显色响应强:释放基团pNA在405 nm处具有较高的摩尔消光系数,可实现低浓度酶活性的精确检测。
• 方法学经典:S-2222是FXa活性检测领域引用最广的发色底物之一,方法学性能经四十余年反复验证。
✅ 方法稳健,结果直观
• 检测便捷:释放的pNA在405 nm处直接比色定量,无需复杂样本前处理或衍生化步骤。
• 平台适配性:反应动力学稳定,适用于终点法或动力学法,兼容自动化凝血分析仪及常规酶标仪。
✅ 储存稳定,性能持久
• 干粉稳定性:干粉状态在-20°C下长期稳定(HPLC纯度 > 98%),为采购备货提供充裕的有效期窗口。
• 溶液兼容性:配制后的工作液在适当条件下可稳定存放,便于日常实验安排。
✅ 供应自主,采购无忧
• 国产化生产:关键合成路线及纯化工艺完全自主可控,不受进口管制或国际物流波动影响。
• 性能对标进口:经HPLC及方法学验证,性能参数可对标进口品牌。
• 现货供应:常备现货库存,支持从毫克级研发试用至克级批量采购的多规格定制,满足不同实验阶段的需求。
五、高频 Q&A答疑
Q1:S-2222对哪些酶有响应?
A:S-2222对FXa高度敏感,同时对胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、顶体蛋白酶和XIIa因子也有较高灵敏度。但对凝血酶不敏感,对大多数其他测试酶类(如因子IXa、激肽释放酶等)也不敏感。
Q2:S-2222与S-2238有什么区别?
A:两者靶向完全不同的凝血因子,根据检测目标选择合适的底物。
• S-2222靶向FXa,序列为Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA,主要用于FXa活性检测、肝素抗Xa活性测定、Xa因子抑制剂检测等场景,对凝血酶不敏感。
• S-2238靶向凝血酶(Thrombin),序列为H-D-Phe-Pip-Arg-pNA,主要用于凝血酶活性及抗凝血酶III检测,对凝血酶高度敏感。
选型参考:
根据您的检测目标决定——测FXa相关指标选S-2222,测凝血酶相关指标选S-2238。两者均为发色底物法检测,操作流程和检测平台(405 nm)一致,可灵活配合使用于同一凝血体系中。
Q3:S-2222和S-2765都是FXa发色底物,有什么区别?该如何选择?
A:两者均为FXa发色底物,核心区别在于序列设计和应用侧重。
• S-2222的序列为Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA,直接模拟凝血酶原中FXa的天然酶切位点,对FXa高度敏感,对凝血酶不敏感,拥有四十余年的文献积累和广泛的临床应用。
• S-2765的序列为Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA,为人工设计序列,对FXa的亲和力更高(Km值更低),灵敏度更高,同样被广泛应用于FXa活性检测和肝素抗Xa活性测定。
选型参考:
两款底物各有侧重——S-2222的序列直接模拟FXa天然酶切位点,文献积累深厚;S-2765对FXa的亲和力更高,灵敏度更高。两者均有药典方法支持,具体选择建议参考实验室现行体系或历史数据习惯,或联系技术团队获取进一步建议。
Q4:S-2222有哪些盐型?在开发IVD试剂盒时怎么选?
A:S-2222提供游离态、盐酸盐、醋酸盐、甲酯化物等多种形式,不同盐型的显色反应原理完全一致,检测结果不受盐型影响,主要差异在于溶解性和缓冲体系兼容性。
选型参考:
• 常规试剂盒开发(通用推荐):醋酸盐(CAS: 1325307-57-0)或盐酸盐(CAS: 60457-00-3)水溶性好,适用于大多数血凝仪或酶标仪试剂盒的开发。
• 高灵敏度需求:含有改性结构的混合甲酯盐酸盐在特定水解反应中表现出极高的催化响应,适合低浓度靶标分析。
• 特殊缓冲体系:若试剂盒对氯离子敏感,建议选择醋酸盐形式。
如不确定,可联系技术团队根据您的具体配方提供建议。
Q5:S-2222适合用于自动化检测吗?
A:适合。S-2222反应动力学稳定,已广泛应用于自动化凝血分析仪的配套检测,采用动力学法为首选方案,也可兼容终点法,适配自动化凝血分析仪及常规酶标仪。建议客户根据自身仪器平台进行验证,以确定最佳适配条件。
Q6:S-2222如何储存?复溶后能保存多久?
A:建议在-20°C条件下干燥保存。本品具有一定吸湿性,需注意防潮。复溶时建议使用去离子水或指定缓冲液,配制的工作液建议分装保存,避免反复冻融和微生物污染。
Q7:S-2222的质量标准是什么?
A:产品执行HPLC纯度>98%的质量标准,关键指标(纯度、水分、含量等)逐批检测,确保批次间一致性。储存条件明确要求-20°C冷链保存,符合FXa特异性底物类原料的常规质控要求,为下游产品的稳定性提供基础保障。
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